牛奶是最古老的(de)天然飲料之一,被譽為“白色血(xuè)液”,對(duì)人體的重要性可(kě)想而知。而組成人體蛋白質的氨基酸(suān)有20種,其中有8種(zhǒng)是人體本身不能合成(chéng)的(嬰兒(ér)為9種,比成人多的是組氨酸),這(zhè)些氨基酸稱為必需氨基酸。我們進食(shí)的蛋白質中如果包含(hán)了所有的必需氨基(jī)酸,這種蛋白質便叫作全蛋白。牛奶中的蛋白(bái)質(zhì)便是全蛋白。
今天,我們通過實驗介(jiè)紹純牛奶及(jí)酸奶的蛋白質測定(dìng)方法。
1.實驗部分
1.1儀器
N310自(zì)動凱氏定(dìng)氮儀(格(gé)丹納)
DS-360-42H高溫石(shí)墨消解儀(格丹納)
1.2試劑與耗材 鹽酸或硫酸(suān)溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標準滴定液。
硼酸溶液:質量分數 2% 。
氫(qīng)氧化鈉溶液(yè):質量分數 40% 。
溴甲酚(fēn)綠 - 甲基紅混(hún)合指(zhǐ)示劑(jì):將溴甲酚綠乙醇溶液(yè) (1g/ L) 與甲(jiǎ)基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時混合搖勻備用。
實驗中涉及到的試劑,均為優級純或分析純;
實驗(yàn)用水為無氨蒸餾水。
催化劑片: 3g 硫酸鉀(jiǎ)和 0. 2g 硫酸銅混合均勻(yún)壓片
1.3實驗過程
1.3.1取樣 準確稱量2-3g 的樣品(精確至0.1mg ),加催化劑一片(piàn)(或硫酸鉀5g 與硫酸銅0.5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL。
1.3.2石墨消解 利用DS-360-42H高溫石墨消解(jiě)儀進行消解,將消解管放在石墨爐(lú)上,蓋上排氣罩(zhào),連接廢氣吸收係統,設定(dìng)消解溫度參數如下表:
消(xiāo)解(jiě)完,取下消解管並冷卻。
1.3.3上機測試 待消解管內溶液冷卻至室溫後,將消解管放置於N310自動凱氏定氮儀(yí)上,開始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下:
1.3.4儀器自動滴定並給出計算結果。
2.結果與討論
采用多孔石墨消解儀可以快速大批量(liàng)對樣品進行消解,比電熱板消(xiāo)解速度跟效率都要大大提高,回收率(lǜ)也得到保障,使用凱氏定氮儀測試奶製(zhì)品中蛋白質(zhì)含量,結果準確,平行性良好。